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为何有些抗体做WB检测到的条带与理论大小相比有区别?

发布时间:2018-01-05 10:30:05来源:科捷生物

  为何有些抗体做WB检测到的条带与理论大小相比有区别?

  导致这一结果的主要原因有:

  1.天然蛋白存在某些修饰情况,如磷酸化、糖基化等,这些修饰都会导致蛋白质的分子量增加。

  2.有些蛋白存在不同的isform,每个isform得到的蛋白大小都有所差别。

  3.氨基酸组成,不同氨基酸所带电荷不一样,导致相对电荷不同,迁移率有所差异,通过SDS-PAGE电泳检测的大小会有所偏差。

  4.多聚体(二聚、三聚等),多聚体形式的蛋白常常会抵制WB所做的还原条件,还原不完全等会导致检测条带偏大。

  5.翻译后的剪切,有些蛋白以前体的形式合成或者带有信号肽,翻译后剪切掉前肽或者信号肽,导致检测条带变小。

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