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荧光二抗标记用HRP、AP、FITC、生物素法各发什么颜色荧光?

发布时间:2018-11-05 10:41:45来源:科捷生物

  HRP和AP是酶,二抗上连接了酶,要有相应的底物才能显色,可以用化学发光免疫检测底物 ,显色方式可以通过发荧光也可以不发荧光(例如给予ECL底物,其中的H2O2和鲁米诺在HRP的作用下,能在黑暗中发出荧光;也可以给予双氧水和DAB,反应产生棕色不溶于水的物质)。根据酶系来选择底物,可以分为HRP和AP底物系统。HRP分子量小,稳定,便宜,反应快速,而AP分子量大,酶促反应慢。

  FITC为异硫氰酸荧光素,本身就是黄绿色荧光,二抗结合后可直接在荧光显微镜下观察;

  生物素一般也是挂在二抗上的,利用卵白素分别连接生物素标记的第二抗体和生物标记的酶,由酶催化底物,生成终产物,这个终产物也是不溶于水的。


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