为什么融合后得不到阳性克隆?
发布时间:2019-05-03 10:47:02来源:科捷生物
为什么融合后得不到阳性克隆?
可能的原因:
1.动物未免疫成功就进行了融合。
2.融合后得到的克隆较少,故得到阳性克隆的机率也较小。
3.筛选克隆方法不正确。例如有些小分子物质不能直接包被到酶标板上,使用了不合适的二抗等诸多因素。
4.抗原成份与细胞培养条件中的物质相同或类似,或者与筛选过程中有同抗原结构相同或类似的物质产生了竞争反应。例如,如果需要制备抗BSA 的单抗,则培养杂交瘤的培养基中能含有牛血清,否则牛血清中的BSA 直接与抗体相结合,最后做ELISA 筛选时无法得到阳性结果。解决的办法只有使用其他动物的血清或者使用无血清培养基。制备酪蛋白的单抗,做ELISA 筛选时,二抗的稀释液不能使用脱脂奶粉。
5.其它所有能影响ELISA 等相关筛选手段的因素。