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抗原抗体基础知识和基本概念
2019-10-17 21:08:32

抗原

指能够刺激机体产生(特异性)免疫应答,并能与免疫应答产物抗体和致敏淋巴细胞在体内外结合,发生免疫效应(特异性反应)的物质。抗原的基本特性有两种,一是诱导免疫应答的能力,也就是免疫原性,二是与免疫应答的产物发生反应,也就是抗原性。


抗体

免疫球蛋白子家族成员,在淋巴细胞表面,动物体外分泌和血管外流质中存在着不同种类的免疫球蛋白,抗体则是母体受外来的物质或者内源性的某些物质刺激而产生的母体蛋白。这种效应是母体用来抵御外来入侵的物质或者有机体而保护自身的一种方式,在这个过程中,B-淋巴细胞能够使用一种特殊的受体识别并绑定抗原决定簇,从而促使一系列分裂和分化过程,使B-淋巴细胞变为体细胞,正是这些淋巴细胞或者体细胞合成了抗体。


多克隆抗体

用一种包含多种抗原决定簇的抗原免疫动物,可刺激机体多个B细胞克隆产生针对多种抗原表位的不同抗体。所获得的免疫血清实际上是含有多种抗体的混合物,即多克隆抗体,也称之为第一代抗体。


单克隆抗体

由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体,称为单克隆抗体。通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群,可制备针对一种抗原表位的特异性抗体即单克隆抗体,也称之为第二代抗体。


一抗

一抗就是能和非抗体性抗原特异性结合的免疫球蛋白。种类包括单克隆抗体和多克隆抗体。


二抗

二抗是能和抗体结合,即抗体的抗体,其主要作用是检测抗体的存在,放大一抗的信号。二抗是利用抗体是大分子的蛋白质具有抗原性的性质,去免疫异种动物,由异种动物的免疫系统产生的针对于此抗体的免疫球蛋白。


X抗Y抗体

x是宿主,注射到什么体内,x就是什么,抗原来源是什么,y就是什么。如兔抗人某某抗体是指将人的蛋白注入兔子体内产生的抗体(例:将人IL8注入兔子体内产生的抗体叫做兔抗人IL8抗体)。



基因工程抗体

采用基因工程的手段研究抗体与功能的关系,并对抗体基因进行改造和重组等,由此制备出的基因工程抗体,也称之为第三代抗体。


蛋白免疫印迹杂交WB(Western Blot)

是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离,再转移到杂交膜(blot)上,然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法。


免疫组织/细胞化学IHC /ICC(Immunohistochemistry/Immunocytochemistry)

是应用免疫学基本原理--抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究。


免疫荧光IF (Immunofluorescence)

是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。它是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光基团,再用这种荧光抗体(或抗原)作为探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。利用荧光显微镜可以看见荧光所在的细胞或组织,从而确定抗原或抗体的性质和定位,以及利用定量技术(比如流式细胞仪测定含量。


免疫沉淀IP(Immunoprecipitation)

主要是用于抗原或抗体的定性检测,以及纯化目的蛋白质的常规方法。其基本原理是利用抗原与抗体免疫反应,在蛋白质提取液中加入与抗原(目的蛋白质)特异性结合的抗体,抗原与抗体将形成免疫复合物,再与蛋Protein A/G 共同孵育后,免疫复合物经过纯化,洗脱后进行SDS-PAGE及Western blotting分析,从而达到纯化目的蛋白质、定性检测抗原或抗体的目的。

流式细胞术FCM(Flow Cytometry)

利用流式细胞仪对处于快速流动的细胞或生物颗粒进行多参数、快速(每秒可达1000-10000个)的定量分析和分选(纯度可达99%以上)的技术,可对单个细胞逐个地进行高速准确的定量分析和分类。


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